La modellatura delle cellule prevede le fasi di iniezione, modellatura e ottenimento delle cellule. Le cellule nel pallone di coltura cellulare devono crescere e svilupparsi in una certa misura. In questo momento, è necessario fare affidamento sulla tripsina per digerire le cellule sulla parete esterna del pallone e poi sentirle. Nel caso degli enzimi, il tempo di digestione deve essere controllato.
Pallone per coltura cellulare T75
La tripsina appartiene a una diversa classe di tripsina, che può degradare le proteine sulle membrane cellulari fuse ai flaconi di coltura cellulare. Dissolvendo la proteina sulla parte corrispondente, la proteina alla giunzione tra le proteine viene dissolta e la cellula diventa sferica a causa della forza di supporto del telaio cellulare della propria struttura interna, separando così le cellule. Il livello di digestione della tripsina è un fattore chiave nella formazione delle cellule: una digestione eccessiva aumenta i detriti cellulari, i detriti neri aumentano, le cellule cadranno nel loro insieme, compromettendo seriamente la vitalità cellulare, e alcune cellule galleggiano, con il deflusso della tripsina scartato; se la digestione non è sufficiente, è difficile che le cellule vengano espulse dalla parete interna della bottiglia, e anche il continuo soffiare e battere danneggerà l'attività cellulare.
pallone di coltura cellulare
Flacone per soluzione di coltura proteica del siero
In diverse istituzioni o cellule, l'effetto degli enzimi pancreatici non è lo stesso. L'attività delle cellule disperse dell'enzima pancreatico è anche correlata al suo valore di concentrazione, temperatura e durata dell'effetto. Quando il pH è 8.0 e la temperatura è 37, il livello di efficacia della soluzione acquosa di enzimi pancreatici è relativamente forte. Quando si applica la tripsina, la concentrazione, la temperatura e la durata devono essere ben controllate per prevenire danni cellulari causati da un'eccessiva digestione. Poiché Ca2, Mg2 e proteine sieriche, i grammi proteici riducono l'attività della pancreatina, quindi quando si prepara una soluzione acquosa di pancreatina, utilizzare BSS senza Ca2, Mg2, come: soluzione D-Hanks. Quando si interrompe la digestione, la tripsina può essere interrotta con il mezzo di coltura delle cellule proteiche del siero o con il ritardante della tripsina per arrestare l'effetto della tripsina sulle cellule.
pallone di coltura
Pallone per coltura cellulare T25
Inoltre, se si tratta di una cellula appena acquistata, è possibile utilizzare una concentrazione inferiore di tripsina per esplorare prima il tempo di digestione e osservare se le cellule diventano rotonde ogni minuto e registrare bene. Tutto sommato, quando si ottengono le cellule nel pallone di coltura cellulare, è necessario controllare il tempo di tripsinizzazione, in modo da mantenere efficacemente la vitalità delle cellule.
